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刘耀光研究员指导的博士生在Molecular Plant发表论文
2016-07-12 12:50   审核人:

   最近几年兴起的TALENsCRISPR/Cas9基因打靶编辑技术是基因工程技术的热点。经打靶编辑后的基因可产生多种类型的突变形式,而大部分为杂合和双等位突变。同源染色体上的纯合突变可用PCR扩增产物直接测序确定,而对于杂合和双等位突变,则需要经过PCR扩增、克隆、和多样品测序等多个繁琐、耗时的步骤才能鉴定出突变基因型。针对这一问题,亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室刘耀光研究员指导的博士生马兴亮提出了一种简单易行且高效的测序重叠波峰图的解码方法。该方法将含有杂合或双等位突变的PCR产物直接测序,对测序重叠波峰图读取若干简并碱基,利用通用的序列分析软件如DNASTAR/EditSeq等,在野生型序列中查找出对应的碱基序列,可以解码出杂合和双等位突变的2个等位序列。该方法(Degenerate Sequence Decoding, DSD)极大地提高了工作效率,得到同行的高度认可,已于201535日在植物学著名国际学术期刊Molecular PlantIF-5Y2013 = 6.348)在线发表论文(Rapid decoding of sequence-specific nuclease-induced heterozygous and biallelic mutations by direct sequencing of PCR products.DOI: http://dx.doi.org/10.1016/j.molp.2015.02.012)。论文第一作者为马兴亮同学,通讯作者是刘耀光研究员。

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