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蛋白质组学样品送样须知
2015-04-14 11:18   审核人:

一、蛋白质样品送样要求

1、  组织类样品送样要求

1) 组织类样品接收范围

蛋白组织类样品分为三类:a. 蛋白含量丰富,且只含有少量其它杂质,如大鼠肝脏组织、新鲜水稻叶片及人的血液等;b. 蛋白含量正常或较少,但富含其他杂质,如大米富含淀粉;c. 蛋白含量极低,富含其它杂质,如扇贝的贝壳、蛋壳和树皮等;d. 细胞器或亚细胞器,如膜蛋白等。

a类可以接收;b类请与技术人员联系,并提供相应的提取方法和参考文献;c类原则上不接收,建议客户自行提取蛋白;d类原则上不接收,客户自行提取。

2) 组织类样品送样要求请参照组织类样品送样要求表(见表1)。

1组织类样品送样要求表

样品类型

送样量

备注

新鲜动物组织干重

≥100mg

富含杂质或蛋白质含量低的样品量干重≥5g,如植物的根、木质部、韧皮部组织等

新鲜植物组织干重

≥2g

微生物类如真菌、细菌和噬菌体

≥2g

新鲜培养细胞数(个)

≥5×106(细胞沉淀体积

约50µl左右)

 

血液类

血清、血浆≥500µl;全血 ≥5ml

解冻后血细胞会破裂,蛋白溶出来会影响分析,因此一般不建议送全血

唾液、羊水、脑脊液等)

≥5ml

 

尿液

≥50ml

送样品前用1000g离心5min,弃去沉淀

 

3)如果样品材料具有特殊性请备注说明,如具有很厚的荚膜、容易氧化等;如属需要富集的蛋白修饰分析样品,应加大送样量,具体要求请与科技代表联系。

4)对于病原性微生物,或具侵染性的病变组织,必须灭活后送样,并且在样品保存管或保存袋上做好清晰标记;如果样品中有毒性或腐蚀性的物质,必须事先声明。

 

2、 蛋白类样品送样要求

1) 蛋白、肽段、胶点和胶条等蛋白类样品送样要求,请参照蛋白类样品送样要求表(见表2)。

2:蛋白类样品送样要求表

样品类型

服务类型    

蛋白

肽段

胶点、胶条

备注

蛋白全谱分析

≥500µg,浓度≥1µg/µl

消化前蛋白

含量≥50µg

___

 

蛋白定量分析

≥500µg,浓度≥1µg/µl

消化前蛋白

含量≥50µg

___

 

蛋白修饰分析

不富集

≥500µg,浓度≥1µg/µl

富集后肽段≥1µg

___

 

富集不分组分

≥1mg

富集分10组分

≥10mg

蛋白胶条鉴定分析(包含单一蛋白鉴定)

≥30µg,浓度≥1µg/µl

≥50fmol/µl,体积≥10µl;盐含量:挥发性无机盐<20mM,不挥发无机<5mM;

考染或银染

肉眼可见

银染胶不能含用戊二醛;且保证在电泳后一周内进行切胶送样

蛋白胶点鉴定分析

≥50pmol;

盐含量:挥发性无机盐<20mM,不挥发无机<5mM;

≥50fmol/µl,体积≥10µl;盐含量:挥发性无机盐<20mM,不挥发无机<5mM;

≥1.5mm3

考染或银染肉眼可见

蛋白分子量测定

≥5µg,蛋白纯度应>90%,浓度≥1µg/µl;盐含量:挥发性无机盐<20mM,不挥发无机<5mM;

___

___

 

 

2)  为便于实验人员正确、快速地进行样品处理,请准确填写蛋白类样品的前处理信息,告知蛋白样品缓冲液成分及对应浓度,如是否含有硫脲、SDS或强离子盐等;提供肽段样品溶液的液体组分情况,如其中盐离子浓度等。

3)  利用BCA、Bradford等方法进行过样品检测的,请务必附上检测结果,如样品浓度、电泳图等信息。

    为去除样品中影响质谱检测的杂质,我室需对蛋白样品进行还原烷基化、丙酮沉淀、缓冲液更换等处理,最终含量以我室测定为准。

 3、样品运输要求:

    1) 动物与植物组织用液氮速冻后干冰邮寄。

    2)液体样品-20℃冷冻后,置于足够的干冰中邮寄。

    3)全血样品,如果是分析血浆则加入抗凝剂,并冷冻后干冰邮寄;如果分析血清,则将血液冷冻后干冰邮寄(无需加入抗凝剂)。血浆或血清样品,直接冷冻后干冰邮寄。

    4)冻干的胶或干粉可以直接邮寄;切胶后的湿胶(不用做任何处理),放在 EP 管中(不加任何缓冲液),直接邮寄或置于冰袋中(长途运输如需3-5天)邮寄。

    5)样品请置于1.5 ml管中,管上注明样品名称、浓度以及制备时间,管口使用Parafilm封口。建议在运输前将所有样品管固定于50 ml带盖离心管中,再将50 ml管放在封口袋中。

    6)保证运输过程中充足的干冰或冰块,并且尽量选用较快的邮递方式,以降低运输过程中样品降解的可能性。

 

注:

1、所有的生物实验都不排除有意外情况发生,如果在样品制备过程中出现非正常情况,我们会立即与您沟通,准备新的样品。请您保存样品的备份。

2、项目完成,数据提交给甲方后,乙方将不再保存样品,乙方也不返还甲方样品,合同规定的除外。

 

  收费标准:

服务类型

收费标准

备注

蛋白全谱分析

6000元/样

 

蛋白定量分析

6000元/样

 

蛋白修饰分析

12000元/样

糖基化除外

蛋白胶点鉴定分析

450元/样

 

蛋白分子量测定

400元/样

 

 

 

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